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大腸菌群快速檢測技術(shù)及其在營養(yǎng)與食品衛(wèi)生檢測中的應(yīng)用效果分析

發(fā)布時間:2018-06-24 來源: 幽默笑話 點擊:

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  【中圖分類號】R561.32 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851(2018)03-0-01
  大腸菌群主要分布在人畜糞便中,是一種分布較為廣泛的菌群[1],同時也是一種有害菌群,感染后可導致患者出現(xiàn)腹瀉、腹痛、發(fā)熱等癥狀[2],大腸菌群也是食品污染的一個重要因素,在營養(yǎng)與食品衛(wèi)生檢測中,可以借助大腸菌群的生物特性,以特定的技術(shù)檢測是否存在糞便污染,嚴格控制食品上市,保證消費者的健康安全[3]。近幾年,食品安全問題引發(fā)了人們的廣泛關(guān)注,因食品質(zhì)量而引發(fā)的安全問題更是屢見不見,食品污染不僅已經(jīng)嚴重的影響到了人們的身體健康,并造成了比較嚴重的食品信用危機,這就要求在營養(yǎng)與食品衛(wèi)生檢測工作中,能夠以更加科學準確的技術(shù)確定食品是否安全可靠[4]。為了明確大腸菌群快速檢測技術(shù)及其在營養(yǎng)與食品衛(wèi)生檢測中的應(yīng)用效果,此次試驗隨機選取了餅干、糖果、果凍、面包、飲料和飲用水六中食品共500份進行乳糖膽鹽發(fā)酵法和最可能數(shù)法檢測,分析大腸菌群的檢測結(jié)果和兩種檢測方式的相符率,現(xiàn)將具體結(jié)果總結(jié)如下。
  1 資料與方法
  1.1 一般資料
  隨機選取餅干、糖果、果凍、面包、飲料和飲用水六種食品共500份作為試驗樣本,所有樣本均為2017年12月1日至2017年12月30日近期生產(chǎn)的產(chǎn)品,且均在保質(zhì)期內(nèi),產(chǎn)品包裝完好無損,不存在漏氣、脹袋等情況,所有產(chǎn)品選自市面上不同企業(yè)所生產(chǎn)的產(chǎn)品。為了保障檢測樣本的廣泛性和代表性,本次所檢測食品是從本市多個食品批發(fā)地隨機選取的,以準確的把握食品在出廠后是否存在污染。
  1.2 方法
  1.2.1 試驗原理
  大腸菌群是一種具有發(fā)酵乳糖和產(chǎn)酸產(chǎn)氣作用的革蘭陰性無芽胞菌,該菌群同時具有需氧和厭氧兩種性質(zhì)[5],通常意義下的大腸菌群主要指陰溝腸桿菌、大腸埃希菌、產(chǎn)氣克雷伯氏菌和檸檬酸桿菌等幾種[6],這些均勻一般存在于人畜糞便當中,因此可用于檢測食物是否存在糞便污染,這對于保障食品的安全具有非常重要的意義[7]。
  1.2.2 檢測準備
  準備一個冰箱,將冰箱溫度調(diào)節(jié)到0~4攝氏度之間,準備一個恒溫培養(yǎng)箱,恒溫培養(yǎng)箱的溫度為(36±1)攝氏度,準備一個恒溫水浴鍋,溫度調(diào)節(jié)為(46±1)攝氏度,準備一個10~100倍的顯微鏡。儀器準備還包括:均質(zhì)器、滅菌乳缽、精度為0.5g的0~500g架盤藥物天平;精度為0.01~1的1ml滅菌吸管;容量為500ml的滅菌錐形瓶;90mm滅菌培養(yǎng)皿一個;5mm滅菌玻璃珠一個;16mm滅菌試管一支以及常規(guī)試驗用具剪子、鑷子、滅菌刀具等等[8]。
  1.2.3 培養(yǎng)基與試劑準備
  乳糖發(fā)酵管、乳糖膽鹽發(fā)酵管以及伊紅美藍瓊脂平板、革蘭氏染色液、滅菌生理鹽水、EC肉湯以及磷酸鹽緩沖液[9]。
  1.2.4 實驗方式 取25ml樣品置于225ml滅菌生理鹽水當中,充分搖勻后,調(diào)配到1:10的均勻稀釋液,固體樣品取同等量放入稀釋液中,置于均質(zhì)器內(nèi),以8000~10000r/min處理1分鐘,混合成1:10的均勻稀釋液。使用滅菌吸管吸取稀釋液,注入到其它稀釋液的試管中,搖勻后制成1:100的稀釋液,反復按照這一步驟操作,以10倍數(shù)對稀釋液進一步稀釋。每一個稀釋度分別接種三種肉湯管中,放置在(36±1)攝氏度的恒溫培養(yǎng)箱溫中,培養(yǎng)(24±2)h,當乳糖管產(chǎn)氣,革蘭氏陰性,無芽孢桿菌則為大腸菌群陽性。
  1.2.5 分離培養(yǎng)
  將乳糖管產(chǎn)氣轉(zhuǎn)移到伊紅美藍瓊脂平板上,置入(36±1)℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18~24h,觀察菌落形態(tài),而后進行革蘭氏染色試驗,若觀察到伊紅美藍瓊脂平板出現(xiàn)黑紫色,則表示大腸菌群陽性[10]。
  1.3 觀察指標
  對比乳糖膽鹽發(fā)酵法和最可能數(shù)法的檢測結(jié)果,分別對比檢測合格率和對大腸菌群的檢測結(jié)果相符率。
  1.4 統(tǒng)計學處理
  本實驗使用SPSS19.0進行統(tǒng)計學分析,計數(shù)資料采用(%)表示,使用檢驗,計量資料采用(±s)表示,采用t值檢驗,P<0.05代表研究具有統(tǒng)計學意義。
  2 結(jié)果
  在本次研究中,乳糖膽鹽發(fā)酵法和最可能數(shù)法所測定的產(chǎn)品合格率樣本數(shù)均為435份,合格率為87.0%,兩種檢驗方式合格率比較不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05,=0),在檢測的產(chǎn)品中,兩種檢測方式下對大腸菌群的檢測結(jié)果相符的產(chǎn)品有480份,符合率為96.0%,有20份產(chǎn)品檢測結(jié)果不同,不符合率為4.0%。
  3 討論
  大腸菌群影響是食品安全與衛(wèi)生的一種重要因素,傳統(tǒng)的食品檢測方式下,往往需要等待很長時間才能得到結(jié)果,近幾年,隨著科學技術(shù)的發(fā)展,大腸菌群快速檢測技術(shù)逐漸被應(yīng)用到了營養(yǎng)與食品衛(wèi)生檢測工作中,檢測速度明顯提升,檢測效果也更加準確[11]。與傳統(tǒng)的營養(yǎng)和食品衛(wèi)生檢測技術(shù)相比,快速檢測技術(shù)的應(yīng)用不僅僅是在速度上有所提升,在準確度和經(jīng)濟性方面也遠遠的優(yōu)于傳統(tǒng)檢測技術(shù)。
  近年來,人們的食品衛(wèi)生與安全意識逐漸提高,對食品安全檢驗也有了更高的要求。因此,需要一種更加準確的檢測技術(shù)能夠全面的檢測出食品中有有害物質(zhì),實現(xiàn)問題產(chǎn)品上市前的準確截流,保障食品市場的安全。
  本研究所采用的乳糖膽鹽發(fā)酵法主要是利用了大腸菌群對乳糖的分解作用。一般情況,任何大腸菌群在分解乳糖時,都會產(chǎn)氣產(chǎn)酸,借助這一特點,使用伊紅美藍瓊脂結(jié)合大腸菌群,就會形成黑色化合物,那么在檢測過程中,當觀察到平板呈黑紫色時,則可以認為食品中存在大腸菌群的可能性非常高。
  在本次研究中,乳糖膽鹽發(fā)酵法和最可能數(shù)法所測定的產(chǎn)品合格率樣本數(shù)均為435份,合格率為87.0%,兩種檢驗方式合格率比較不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05,=0),在檢測的產(chǎn)品中,兩種檢測方式下對大腸菌群的檢測結(jié)果相符的產(chǎn)品有480份,符合率為96.0%,有20份產(chǎn)品檢測結(jié)果不同,不符合率為4.0%。這一結(jié)果說明:乳糖膽鹽發(fā)酵法和最可能數(shù)法對食品中大腸菌群的檢測準確度幾乎不存在差異,因此,快速檢測技術(shù)雖然提高了檢測速度,但檢測結(jié)果的準確性并不受到影響。此外,快速檢測技術(shù)還能更加準確的檢測出食品中存在的菌群,便于檢測人員更加準確的了解到食品污染的類型。

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