[摘 要]目的 建立長(zhǎng)春花中文多靈的含量分析方法，比較不同來(lái)源長(zhǎng)春花藥材中文多靈的含量。方法 采用高效液相色譜法，以依利特C18柱為分析柱，甲醇∶水（體積比64∶36，以二乙胺和磷酸調(diào)pH11）為流動(dòng)相，流速為1 mL/min；220 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。 結(jié)果 紅色長(zhǎng)春花、白色長(zhǎng)春花以及恩平、陽(yáng)江、廣州紫色長(zhǎng)春花樣品中文多靈含量分別是1.561、0.390、0.982、0.622、0.587 mg/g。結(jié)論 不同來(lái)源的長(zhǎng)春花中文多靈的含量差異較大。
　　[關(guān)鍵詞]高效液相色譜法；長(zhǎng)春花；文多靈
　　中圖分類號(hào)：Q949.95文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1009-914X（2013）17-0248-01
　　長(zhǎng)春花（Catharanthus roseus （L.） Don.）為夾竹桃科長(zhǎng)春花屬植物，原產(chǎn)于非洲馬達(dá)加斯加島西印度一帶的熱帶森林地區(qū)，早在宋代以前就傳入我國(guó)。全株入藥，有利尿止血、鎮(zhèn)定安神、平肝降壓等功效，常用來(lái)治療瘧疾、腹瀉、糖尿病、高血壓、皮膚病及何杰金氏病。長(zhǎng)春花含有100多種吲哚生物堿，其中主要成分長(zhǎng)春堿臨床上廣泛用于治療急性白血病、何杰金氏病、惡性淋巴肉瘤、絨毛膜上皮癌等。文多靈生物堿為長(zhǎng)春花植物體內(nèi)合成長(zhǎng)春堿的前體。長(zhǎng)春花分布于全國(guó)各地，在廣東亦有大量栽培，而且種類繁多，但廣東省不同來(lái)源長(zhǎng)春花藥材中文多靈的含量情況卻未見有文獻(xiàn)報(bào)道。本文采用高效液相色譜法對(duì)5批不同來(lái)源的長(zhǎng)春花中文多靈的含量進(jìn)行了測(cè)定。
　　1 儀器與試藥
　　天美LC 2000高效液相色譜儀，包括LC2030紫外檢測(cè)器，LC2130 PUMP，T2000P色譜工作站。
　　文多靈對(duì)照品購(gòu)于天津中新藥業(yè)，純度為99.5%，符合HPLC定量分析的要求；分析用長(zhǎng)春花樣品采自廣州或廣東其他地區(qū)，經(jīng)本校藥用植物教研室曾令杰副教授鑒定為長(zhǎng)春花（Catharanthus roseus （L.） Don.），白花長(zhǎng)春花（Catharanthus roseus var. albus G. Don，Vinca rosea var. alba Sweet）；甲醇為色譜純，水為雙蒸水。
　　2 方法與結(jié)果
　　2.1 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性考察
　　色譜柱：Yilite C18柱（10 μm，4.6 mm×250 mm）；流動(dòng)相：甲醇水（體積比64∶36，以二乙胺和磷酸調(diào)pH11）；流速：1 mL/min；進(jìn)樣量：20 μL；檢測(cè)波長(zhǎng)：220 nm。在該色譜條件下，文多靈的保留時(shí)間為13.591 min。
　　2.2 對(duì)照品的制備
　　精密稱取文多靈0.010 80 g置25 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至25 mL，搖勻，即得質(zhì)量濃度為0.432 0 mg/mL的對(duì)照品貯備液，置冰箱中保存，備用。
　　2.3 樣品溶液的制備
　　精密稱取干燥藥材粉末各2 g，以氨水浸潤(rùn)加三氯甲烷70 mL在室溫下超聲提取30 min，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液50 mL，蒸干，用甲醇溶解并完全轉(zhuǎn)移至10 mL的量瓶中，甲醇定容，即得。
　　2.4 線性關(guān)系考察
　　分別精密吸取“2.2”項(xiàng)下對(duì)照品貯備液1、2、3、4、5 mL置10 mL量瓶中，用甲醇定容，搖勻，配成濃度分別為0.043 2，0.086 4，0.129 6，0.172 8，0. 216 0 mg/mL的對(duì)照品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以文多靈質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，測(cè)得峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為
　　y=24416182.870x+218182（R2=0.999，n=5）
　　結(jié)果表明，文多靈檢質(zhì)量度在0.043 2～0.216 0 mg/mL范圍內(nèi)與峰面積積分值線性關(guān)系良好。
　　2.5 精密度試驗(yàn)
　　分別精密吸取“2.2”項(xiàng)下對(duì)照品貯備液20 μL，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件重復(fù)進(jìn)樣5次，結(jié)果，峰面積積分值的RSD=1.79%，符合HPLC定量分析要求。
　　2.6 加樣回收率試驗(yàn)
　　取同一批長(zhǎng)春花樣品6份，每份約1 g，分別精密加入對(duì)照品溶液適量，按“2.3”項(xiàng)下提取制備供試品溶液，并按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行含量測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果表明文多靈的平均回收率為97.2%，RSD=1.68%。
　　2.7 樣品的測(cè)定
　　分別精密吸取“2.3”項(xiàng)下樣品溶液20 μL，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定。結(jié)果表明：不同來(lái)源的長(zhǎng)春花中文多靈含量差異較大，紅色長(zhǎng)春花中的含量最高，紫色長(zhǎng)春花中的含量次之，白色長(zhǎng)春花中的含量最少；陽(yáng)江產(chǎn)與恩平產(chǎn)的紫色長(zhǎng)春花中文多靈含量也有差異。
　　3 討論
　　3.1 本文先后采用甲醇水（以二乙胺和磷酸調(diào)pH11）體積比為60∶40，62∶38，64∶36，65∶35的流動(dòng)相進(jìn)行分離，結(jié)果以體積比為64∶36時(shí)，文多靈得到了較好的分離，峰形良好，回收率穩(wěn)定，并且其他成分對(duì)文多靈的檢測(cè)不形成干擾，說(shuō)明建立的分析方法可行。
　　3.2 研究結(jié)果表明，不同來(lái)源的長(zhǎng)春花中文多靈含量有較大的差異，紅色長(zhǎng)春花中文多靈的含量最高，紫色長(zhǎng)春花次之，白色長(zhǎng)春花含量最少。不同產(chǎn)地的長(zhǎng)春花文多靈含量差異也較大，在所檢測(cè)的紫色長(zhǎng)春花中，恩平所產(chǎn)的文多靈含量最高，陽(yáng)江的次之，廣州的最低。表明遺傳因素和環(huán)境條件都影響著長(zhǎng)春花中文多靈的含量水平。
　　3.3 本文首次對(duì)不同來(lái)源的長(zhǎng)春花藥材中文多靈的含量進(jìn)行了探討，為長(zhǎng)春花品種的篩選和培育提供了科學(xué)的依據(jù)，為中藥材長(zhǎng)春花的規(guī)范化栽培奠定了基礎(chǔ)。參考文獻(xiàn)
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