摘 要 為比較8個(gè)不同產(chǎn)地絞股藍(lán)中多糖含量的差異，采用水加熱回流提取法提取絞股藍(lán)中多糖，采用蒽酮-硫酸比色法測(cè)定不同產(chǎn)地絞股藍(lán)中多糖含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同產(chǎn)地的絞股藍(lán)中多糖含量分別為7.85%、6.18%、7.47%、6.31%、4.84%、6.25%、6.04%、3.87%。本試驗(yàn)建立的絞股藍(lán)中多糖含量測(cè)定方法簡(jiǎn)便、穩(wěn)定、可行，不同產(chǎn)地絞股藍(lán)中多糖含量存在差異，該結(jié)果為今后絞股藍(lán)的開(kāi)發(fā)利用和深入研究提供一定的參考。
　　關(guān)鍵詞 絞股藍(lán)；多糖；含量測(cè)定；不同產(chǎn)地
　　中圖分類號(hào)：R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.09.055
　　絞股藍(lán)[Gynostemma pentaphyllum（Thunb.） Makino]系葫蘆科（Cucurbitaceae）絞股藍(lán)屬（Gynostemma）多年生草質(zhì)藤本植物[1]�！吨兴幋筠o典》名七葉膽，別名小苦藥、遍地生根、五葉參，日本名甘茶蔓等[2-4]。該屬植物基源復(fù)雜、品種繁多，我國(guó)有14種和3變種[5]，廣泛分布于陜西、四川、湖北、福建、云南等地。絞股藍(lán)中含有皂苷、多糖、黃酮類等化合物及鐵、鋅、銅、錳、硒等20多種微量元素[6]，有“南方人參”“第二人參”的美譽(yù)[7-9]，其中絞股藍(lán)皂苷是絞股藍(lán)主要的藥效成分[10-11]，國(guó)內(nèi)外對(duì)其研究較多。目前對(duì)絞股藍(lán)多糖的研究相對(duì)較少，但有研究表明絞股藍(lán)多糖具有抗癌、抗疲勞、抗氧化、抗衰老等顯著作用[12]。本研究采用蒽酮-硫酸法比較了8個(gè)不同產(chǎn)地絞股藍(lán)多糖的含量，以期為絞股藍(lán)今后的開(kāi)發(fā)利用和深入研究提供一定的參考。
　　1 儀器與材料
　　1.1 儀器
　　7200型可見(jiàn)分光光度計(jì)（尤尼科儀器有限公司）。
　　1.2 材料
　　8種不同產(chǎn)地的絞股藍(lán)購(gòu)自于成都藥材市場(chǎng)，經(jīng)四川衛(wèi)生康復(fù)職業(yè)學(xué)院副主任藥師鐘輝云鑒定為葫蘆科絞股藍(lán)屬植物絞股藍(lán)；所用試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純，水為超純水。
　　2 方法與結(jié)果
　　2.1 對(duì)照品溶液的制備
　　準(zhǔn)確稱取葡萄糖對(duì)照品22.5 mg、12.5 mg、8.3 mg、6.2 mg、3.1 mg加水定容至50 mL。
　　2.2 供試品溶液的配制
　　分別取1 g不同產(chǎn)地絞股藍(lán)干燥粗粉，加10 mL 95%乙醇，80 ℃條件下回流提取2次，每次2 h，過(guò)濾。藥渣用10 mL水90 ℃回流提取2次，每次2 h，過(guò)濾，濾液定容至25 mL，得供試品溶液。
　　2.3 顯色劑配制
　　取硫酸190 mL，緩慢加入含有約50 mL水的250 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。準(zhǔn)確稱取蒽酮50 mg置于50 mL容量瓶中，逐漸加入上述硫酸溶液至刻度，搖勻即得。
　　2.4 線性關(guān)系的考察
　　分別準(zhǔn)確量取1 mL對(duì)照品溶液，加入 5 m L顯色劑，同法操作為空白對(duì)照，然后沸水浴，10 min后冷卻至室溫，在625 nm處測(cè)吸光度[13]。以吸光度為縱坐標(biāo)，葡萄糖的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程Y=
　　2 278.3X+0.407 4，R2=0.999 1，線性范圍62～450 μg/mL。
　　2.5 精密度試驗(yàn)
　　準(zhǔn)確量取同一對(duì)照品溶液，依2.4項(xiàng)下方法操作，連續(xù)測(cè)定5次，對(duì)照品吸光度RSD為0.53%。
　　2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)
　　準(zhǔn)確量取同一供試品溶液，按2.4項(xiàng)下方法操作，分別于0 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h測(cè)定吸光度，樣品吸光度RSD為0.82%，表明供試品溶液在5 h內(nèi)穩(wěn)定。
　　2.7 重復(fù)性試驗(yàn)
　　準(zhǔn)確量取同一供試品溶液6份，依2.4項(xiàng)下方法操作，在相同條件下測(cè)定并計(jì)算多糖的含量，結(jié)果RSD為0.75%。
　　2.8 回收率試驗(yàn)
　　取63 mg葡萄糖加入1 g云南絞股藍(lán)中，按2.2項(xiàng)操作，平行6份。依2.4項(xiàng)下方法操作，樣品吸光度RSD為0.63%。
　　2.9 多糖的含量測(cè)定
　　按照2.2項(xiàng)下制備供試品溶液，分別準(zhǔn)確量取1 mL，按2.4項(xiàng)下方法測(cè)定吸光度，由回歸方程計(jì)算多糖含量，不同產(chǎn)地絞股藍(lán)中多糖的含量見(jiàn)表1。
　　由表1可見(jiàn)，多糖由多至少依次為陜西、內(nèi)蒙古、云南、江西、四川、廣東、湖北、福建。
　　3 討論
　　多糖是絞股藍(lán)藥理活性的有效成分，多糖的開(kāi)發(fā)利用具有廣闊的市場(chǎng)前景，選擇多糖含量高的絞股藍(lán)品種可提高絞股藍(lán)的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。采用水加熱回流提取法對(duì)絞股藍(lán)中多糖進(jìn)行提取，采用蒽酮-硫酸比色法對(duì)不同產(chǎn)地絞股藍(lán)中多糖含量進(jìn)行測(cè)定，不同產(chǎn)地絞股藍(lán)總多糖含量為：陜西>內(nèi)蒙古>云南>江西>四川>廣東>湖北>福建。不同產(chǎn)地的絞股藍(lán)多糖含量存在一定的差異，可能是由于生長(zhǎng)環(huán)境的不同造成的，比較8個(gè)不同產(chǎn)地絞股藍(lán)多糖含量，對(duì)今后絞股藍(lán)的開(kāi)發(fā)利用和深入研究有一定的參考意義。
　　參考文獻(xiàn)：
　　[1]陳書(shū)坤.絞股藍(lán)屬植物的分類系統(tǒng)和分布[J].植物分類學(xué)報(bào)，1995，33（4）：403-410.
　　[2]何顯忠，邱江沁.絞股藍(lán)化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2008（s1）：84-86.
　　[3]孫萬(wàn)森，吳喜利，喬成林，等.絞股藍(lán)總皂苷防治多臟器損傷的藥理研究進(jìn)展[J].中成藥，2007，30（2）：241-244.
　　[4]李金青，楊洪軍.絞股藍(lán)的藥理作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2009，3（7）：189-190.
　　[5]丁樹(shù)利，朱兆儀，李勇.絞股藍(lán)及同屬植物的生藥學(xué)研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，1994，29（2）：79-83.
　　[6]金亭亭，孫兆林，江蔚新.絞股藍(lán)化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].亞太統(tǒng)醫(yī)藥，2014，10（16）：30-32.
　　[7]張曉喻，黎艷，雍彬，等.復(fù)方絞股藍(lán)皂苷改善小鼠學(xué)習(xí)記憶的研究[J].食品科學(xué)，2007，28（3）：330-333.
　　[8]周建華，張興亞.絞股藍(lán)開(kāi)發(fā)研究新進(jìn)展及應(yīng)用[J].食品科技，2010，35（2）：74-77.
　　[9]彭亮，李詒，陳杰，等.HPLC測(cè)定不同產(chǎn)地、不同品種絞股藍(lán)中蘆丁和槲皮素的含量[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2016，22（6）：45-47.
　　[10]C Müller， A Gardemann， G Keilhoff， et al. Prevention of freefatty acid -induced lipid accumulation， oxidative stress， and cell death in primary hepatocyte cultures by a gynostemma pentaphyllum extract[J]. Phytomedicine，2012，19（5）：395-401.
　　[11]樸香蘭，吳倩.絞股藍(lán)研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21（7）：1758-1760.
　　[12]劉青青，吳景東.絞股藍(lán)提取液對(duì)自然衰老影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，10（6）：203-205.
　　[13]楊寶慧.不同產(chǎn)地絞股藍(lán)中多糖的含量測(cè)定[J].藥學(xué)研究，2013，32（7）：387-393.
　　（責(zé)任編輯：趙中正）

相關(guān)熱詞搜索：多糖 測(cè)定 產(chǎn)地 含量 絞股藍(lán)