摘要建立了超高效液相色譜串聯(lián)質譜法同時快速測定茶葉中11種植物生長調(diào)節(jié)劑（PGRs）及吡蟲啉、啶蟲脒的方法。樣品經(jīng)乙腈甲酸溶液（99〖KG-3∶〖KG-51，V/V）均質提取，采用C18、強陰離子交換劑（SAX）、N丙基乙二胺（PSA）和無水MgSO4混合吸附劑分散萃取處理，以HSST3色譜柱分離，采用電噴霧（ESI）正負離子同時掃描和可編程多反應監(jiān)測模式（SMRM）檢測，基質匹配溶液外標法定量。6芐氨基嘌呤、多效唑、烯效唑、氯吡脲、甲哌啶、吡蟲啉、啶蟲脒在1～200μg/L和2，4二氯苯氧乙酸、對氯苯氧乙酸、赤霉素、吲哚乙酸、萘乙酸、吲哚丁酸在5～1000μg/L范圍內(nèi)線性良好（R2>0.99）。13種化合物加標回收率在73.1%～108.9%之間，RSD（n=6）值在0.6%～8.0%之間，方法檢出限（LOD，S/N=3）和定量限（LOQ，S/N=10）分別為0.18～9.68μg/kg和0.61～32.26μg/kg。本方法簡便、穩(wěn)定、靈敏，能夠滿足實際檢測需求。
　　關鍵詞茶葉；植物生長調(diào)節(jié)劑；吡蟲啉；啶蟲脒；超高效液相色譜串聯(lián)質譜；分散固相萃取
　　1引言
　　植物生長調(diào)節(jié)劑（Plantgrowthregulators，PGRs）是一類與植物激素具有相似生理和生物學效應的農(nóng)藥（來源包括人工合成及生物中提�。�，自20世紀30年代以來，因其效用高、用量小、殘毒少等特點，廣泛應用于果蔬、茶葉等農(nóng)業(yè)生產(chǎn)領域，如赤霉素[1]、吲哚丁酸[2]、奈乙酸[3]等可通過改變茶樹體內(nèi)的生物合成、運轉和分布，調(diào)節(jié)新梢生理過程，并促進茶樹早發(fā)、多發(fā)，提高產(chǎn)量及品質。吡蟲啉和啶蟲脒屬于煙堿類新型廣譜殺蟲劑，在茶園中應用也十分普遍[4，5]。然而隨著植物生長調(diào)節(jié)劑和煙堿類農(nóng)藥用量增多及使用范圍日益擴大，其安全性也備受關注。研究表明，2赤霉素可能增加腫瘤形成風險[6]，吲哚乙酸可影響心肌功能[7]，2，4二氯苯氧乙酸（2，4D）具有生殖毒性[8]，多效唑存在致畸作用[9]。因此，歐盟、日本、中國等建立了PGRs和煙堿類農(nóng)藥相關限量標準，如歐盟規(guī)定2，4D在藍莓、茶葉中的最高殘留限量值（MRL）為0.1mg/kg；日本規(guī)定赤霉素在檸檬等果蔬中的MRL為0.2mg/kg；我國GB27632014中規(guī)定氯吡脲在葡萄中的MRL為0.05mg/kg，吡蟲啉在茶葉中的MRL為0.5mg/kg[10]等。
　　目前，植物生長調(diào)節(jié)劑和煙堿類農(nóng)藥主要檢測方法包括色譜法[11～13]、色譜質譜法[14～19]等，但絕大部分方法都需要經(jīng)過傳統(tǒng)固相萃取、濃縮、衍生等前處理步驟，存在操作程序繁瑣、污染嚴重、抗干擾差等缺點。前處理作為關鍵技術，2會直接影響方法靈敏度和精密度。茶葉具有典型基質效應，一般方法很難直接適用，迄今尚未發(fā)現(xiàn)同時測定茶葉中多PGRs及煙堿類農(nóng)藥殘留相關研究報道。本研究采用分散固相萃取前處理方法，省去濃縮、固相小柱萃取等步驟，建立了超高效液相色譜串聯(lián)質譜法同時快速測定茶葉中11種植物生長調(diào)節(jié)劑及吡蟲啉、啶蟲脒的方法，本法靈敏、簡便、高效，可滿足茶葉質量監(jiān)測需求。
　　2實驗部分
　　2.1儀器與試劑
　　ABSciexTQ5500型串聯(lián)三重四極桿質譜儀（美國Sciex公司）；LC30A超高效液相色譜儀（日本島津公司）；MillQ去離子水發(fā)生器（美國Millipore公司）；T10高速均質儀（德國IKA公司）；高速冷凍離心機（上海盧湘儀離心機儀器有限公司）。
　　11種PGRs及2種煙堿類農(nóng)藥標準樣品：6芐氨基嘌呤（6Benzylaminopurine，6BA）、多效唑（Paclobutrazol）、烯效唑（Uniconazole）、氯吡脲（Forchlorfenuron）、甲哌啶（Mepiquatchloride）、吡蟲啉（Imidacloprid）、啶蟲脒（Acetamiprid）、2，4二氯苯氧乙酸（2，4Dichlorophenoxyaceticacid，2，4D）、對氯苯氧乙酸（4Chlorophenoxyaceticacid，4CPA）、赤霉素（Gibberellicacid，GA3）、吲哚乙酸（Indole3aceticacid，IAA）、萘乙酸（1Naphthaleneaceticacid，1NAA）、吲哚丁酸（Indole3butyricacid，IBA）（純度≥95.0%，德國Dr.Ehrenstorfer公司）。
　　甲醇、乙腈（色譜純，TEDIA公司）；甲酸銨（99.9%）、甲酸（95%）（德國Sigma公司）；N丙基乙二胺（PSA）、強陰離子交換劑（SAX）、強陽離子交換劑（SCX，美國安捷倫科技有限公司）；C18、石墨化碳黑（GCB）、無水MgSO4、弗羅里硅土（天津博納艾爾杰公司）。
　　茶葉樣品購于浙江省各大茶葉市場。
　　2.2色譜和質譜條件
　　WatersHSST3色譜柱（100mm×2.1mm，1.7μm）；流動相A：1mmol/L甲酸銨水溶液，流動相B：1mmol/L甲酸銨甲醇溶液；梯度洗脫程序：0～1min，10%B；1～2min，10%～70%B；2～6min，70%～98%B；6～8min，98%B；8～8.1min，98%～10%B；8.1～12min，10%B。流速：0.25mL/min；進樣量：1.0μL；柱溫：40℃；運行時間：12min。
　　離子源：電噴霧離子源（ESI），溫度500℃，電壓5500V（ESI+）/ 4500V（ESI ）；霧化氣（GS1）壓力：334.7kPa；輔助氣（GS2）壓力：334.7kPa；氣簾氣（CurtianGas）壓力：241.3kPa。定性與定量離子對、去簇電壓（DP）、碰撞能量（CE）等參數(shù)見表1。
　　2.3樣品制備
　　茶葉樣品粉碎后過200μm篩，稱取2.0g（精確至0.01g）試樣于50mL離心管中，加入乙腈甲酸溶液（99〖KG-3∶〖KG-51，V/V）10mL，渦旋振蕩1min，18000r/min均質提取2min，10000r/min低溫離心10min（5℃），取上清液1mL至裝有100mgC18，50mgSAX，25mgPSA和50mg無水MgSO4吸附劑的2mL離心管中，渦旋1min，10000r/min離心5min，上清液過0.22μm濾膜，待液相色譜串聯(lián)質譜分析。

相關熱詞搜索：調(diào)節(jié)劑 高效 色譜 串聯(lián) 測定