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西雙版納產(chǎn)兒茶藥材兒茶素含量的測定

發(fā)布時(shí)間:2019-08-26 來源: 人生感悟 點(diǎn)擊:


  摘 要:目的:測定云南西雙版納產(chǎn)兒茶藥材中兒茶素的含量。方法:采用反相高效液相色譜法,以兒茶素為對(duì)照品。結(jié)果:按選定的色譜條件,兒茶素在0.6125~9.8μg范圍內(nèi)線性良好,加樣回收率為99.6%,RSD為1.8%(n=5);兒茶樣品檢測含量在14.95~15.84%范圍內(nèi)。結(jié)論:云南西雙版納產(chǎn)兒茶藥材兒茶素含量在15.37%左右,有很高的藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
  關(guān)鍵詞:兒茶素;反相高效液相色譜法;西雙版納
  中圖分類號(hào):R927.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
  文章編號(hào):1007—2349(2007)02—0037-02
  兒茶以豆科植物兒茶樹Acacia catechu(L)Willd去皮后的心材煎汁濃縮而成的干燥浸膏入藥。兒茶為云南特產(chǎn)的“南藥”,是我國民族藥中最早收載《中國藥典》的正品中藥之一。也是我國歷史上有記載的進(jìn)口“南藥”品種之一。《中國藥典》[1]收載兒茶的功能是收濕生肌斂瘡。主治潰瘍不斂,濕疹,口瘡,跌打傷痛,外傷出血。兒茶素類化合物具有明顯的清除體內(nèi)自由基、阻斷N-亞硝基化合物形成、抑制脂氧化酶活性和脂質(zhì)過氧化物作用,并有防突變、防癌等藥理活性。
  兒茶在國外主產(chǎn)于印度、印尼及緬甸;國內(nèi)主產(chǎn)于云南西雙版納,廣西有少量栽培。兒茶主要含有兒茶鞣酸(Catechutannic acid)20%~50%,兒茶素(d-catechin)2%~20%,表兒茶素(epicatechin),兒茶紅(Catechred),槲皮素,樹膠等[2]。西雙版納傣族稱兒茶為“西謝”(傣語),有悠久的栽種歷史。為了更好地開發(fā)利用,筆者用反相高效液相色譜法[3~5],按選定的色譜條件,對(duì)云南西雙版納產(chǎn)區(qū)兒茶藥材6批市售來源的兒茶膏以及自制的兒茶膏進(jìn)行了兒茶素含量測定。
  
  1儀器與試藥
  
  島津LC-20AT(二元泵,無柱溫箱,溫度主要靠空調(diào)調(diào)節(jié));電子分析天平FA2004200g/0.1mg(上海衡平儀器廠);對(duì)照品(+)-CATECHIN98%(SIGMA);乙腈(HPLC級(jí),美國天地);甲醇(HPLC級(jí),美國天地);磷酸(分析純,國產(chǎn));0.45um微孔過濾膜。自制兒茶樣品于2005年12月18日采自云南省西雙版納州景洪市景哈哈尼族鄉(xiāng)的兒茶樹熬制而成,經(jīng)本所彭朝忠主管技師鑒定為豆科植物兒茶樹Acaciacatechu(L.)Willd。6批市售兒茶購于西雙版納。
  
  2方法與結(jié)果
  
  2.1色譜條件 色譜柱:Phenomenex Luna 5uC一18,250mm 4.6ram;流動(dòng)相:A:0.1%H3PO4,B:CAN(85:15);檢測波長:275nm;流速:1.0ml/min;進(jìn)樣量:20ul,梯度洗脫,時(shí)間24min。理論板數(shù)按兒茶素峰計(jì)算大于4000。
  2.2兒茶膏的提取 兒茶樹砍伐后,除去邊材,將心材截成段,削切為長約10cm,厚1cm的薄片,放入鋁鍋(忌用鐵鍋),加8倍量的水煎熬7h,當(dāng)液體由棕紅色變成紫黑色時(shí),用紗布過濾,過濾液濃縮至稀薄漿狀時(shí),改用文火蒸干,以免碳化。浸膏用竹片攪拌,挑起能拉絲時(shí);,取出晾干即成兒茶膏。
  2.3供試品制備 精密稱取兒茶膏樣品粉末80mg,置于100ml容量瓶內(nèi),加50%甲醇約80ml,超聲20min,放冷至室溫,加50%甲醇至刻度,搖勻即成濃度為800ppm的供試品。取1.5~2.0ml供試品置離心試管內(nèi),于12,000轉(zhuǎn)/分鐘轉(zhuǎn)速下離心10min,取上清液進(jìn)樣檢測。
  2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 (1)精密稱取catechin標(biāo)準(zhǔn)品25mg放入50ml容量瓶,加50%甲醇約40ml,超聲至全溶。放冷至室溫,加50%甲醇至刻度,充分震蕩搖勻;(2)倍比稀釋,可得一系列對(duì)照品溶液:500ppm、250ppm、125ppm、62.5ppm、31.25ppm分別進(jìn)樣檢測,以濃度為X軸,以標(biāo)準(zhǔn)樣出峰面積積分值為Y軸作圖,得一直線。結(jié)果表明:兒茶素在O.6126~9.8μg范圍內(nèi)線性良好,回歸線方程為Y=14097X+38106,
  R2=0.9999。取同一濃度的樣品反復(fù)進(jìn)樣檢測,兒茶素峰面積積分值的RSD為2.1%;檢測的重現(xiàn)性兒茶素保留時(shí)間和含量的RSD分別為3.5%、0.9%。對(duì)照品與樣品色譜圖見圖1。
  2.5樣品含量檢測 按選定的檢測方法,對(duì)采集來的云南西雙版納產(chǎn)區(qū)6批市售來源的兒茶藥材兒茶膏以及自制的兒茶膏進(jìn)行了兒茶素含量測定,其檢測結(jié)果見圖2,表1。
  
  注:圖譜1B與自制3號(hào)樣品對(duì)應(yīng),圖2與市售1號(hào)樣品對(duì)應(yīng)
  
  3討論
  
  從表1中可以看出,實(shí)驗(yàn)室自制的兒茶膏(高溫干燥)的兒茶素含量只有10.08%,而未經(jīng)高溫干燥的兒茶素含量達(dá)16.74%,兩者含量差異很大,可能是因?yàn)閮翰杷卦诟邷刈饔孟掳l(fā)生了某些變化,因此,在制作兒茶膏時(shí),要防止高溫使兒茶素含量降低。購買的西雙版納的兒茶樣品兒茶素含量在14.95~15.84%范圍內(nèi),其兒茶素平均含量在15.37%左右,有很高的藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值,有待于進(jìn)一步開發(fā)利用。
  當(dāng)?shù)卮鲎迕耖g在熬制兒茶膏的過程中,一是用鐵鍋煎熬,二是溫度控制不好,容易碳化,含量降低,這些都是由于加工不規(guī)范所造成的,因此要不斷加大對(duì)兒茶藥材的開發(fā)研究,規(guī)范化生產(chǎn)。
  我國兒茶藥材資源日益減少,建議加強(qiáng)栽培推廣。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,過去我國西雙版納勐臘、景洪兩地的海拔500~600m地區(qū)有大面積人工栽培[1]。近2年經(jīng)實(shí)地調(diào)查了解到,因其它熱帶經(jīng)濟(jì)作物的開發(fā)而將原來種植的兒茶樹砍伐,西雙版納兒茶樹的種植面積大為減少。
  兒茶是《中國藥典》中較少收入的提煎膏品種之一,在民間防病治病中應(yīng)用較廣,特別是少數(shù)民族地區(qū),遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出《中國藥典》的范疇,是西雙版納特有的民族藥,在傣藥產(chǎn)業(yè)開發(fā)中,應(yīng)充分利用兒茶資源,加強(qiáng)兒茶產(chǎn)品的開發(fā)研究,以推動(dòng)民族醫(yī)藥的發(fā)展。
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