中藥材GAP體系下白芨組織培養(yǎng)與栽植技術
發(fā)布時間:2019-08-30 來源: 美文摘抄 點擊:
[摘 要] 白芨GAP技術不僅能繼承發(fā)揚傳統(tǒng)的種植、養(yǎng)殖技術和經(jīng)驗,而且可使按規(guī)范生產(chǎn)出的產(chǎn)品達到“優(yōu)質、高產(chǎn)、穩(wěn)定、可控”的要求,縮小與國外發(fā)達國家之間的差距。其中白芨組織培養(yǎng)是白芨GAP栽培的前提,基于此,本文簡要介紹白芨組織培養(yǎng)技術、白芨組培苗GAP栽培技術要點,以供參考。
[關鍵詞] 白芨;GAP技術;組織培養(yǎng);栽培
[中圖分類號] S567.239 [文獻標識碼] B [文章編號] 1674-7909(2018)08-100-3
1 白芨形態(tài)特征與作用
白芨[Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.]是蘭科白芨屬多年生草本植物,株高33~50 cm。肉質塊莖,乳白色,具1~3叉呈菱角狀;根系為須根,常并生;總狀花序,常有花2~7朵,花為淡紫紅色,不整齊;蒴果呈柱狀,外具縱棱,兩端微尖;種子極小,多數(shù);ㄆ5—7月,果期8—9月。白芨有2種生態(tài)類型,一種花白色稍黃,葉條狀披針形,為狹葉白芨。另一種為紫花白芨,紫花白芨又有大種白芨、小種白芨之分,其中以大種白芨塊莖產(chǎn)量較高[1]。
白芨是一種重要的傳統(tǒng)中藥,主要分布在云南、貴州等省區(qū)。此外,安徽、江西等省區(qū)也有少量分布。幾乎遍布于云南省海拔1 600~2 600 m的林下、溝谷巖縫中、潮濕山坡與巖石上,喜溫暖,耐陰性強。藥用假鱗莖,10月莖葉黃枯時采收。性微寒,味苦,用于治療肺傷咳血、外傷出血、潰瘍疼痛等!侗静菥V目》載:“氣味苦辛,無毒。主治癰瘡惡瘡敗疽,傷陰死肌,胃中邪氣,賊風鬼擊,痱緩不收。除白癬疥蟲。結熱不消,陰下痿,面上皯皰,令人肌滑。止驚邪血邪血疬,痢疾風痹,赤眼癥結,溫熱瘧疾,發(fā)背瘰疬,腸風癢痿,撲損,刀箭瘡,湯火瘡,生肌止痛。止肺血。附方:跌打骨折:酒調白芨末二錢服,其功不減自然銅、古銖錢也”。江西省、湖南省與云南省近15家中藥廠用白芨假鱗莖制白芨片、粉、糖漿與沖劑。白芨現(xiàn)已列入瀕危野生保護植物,也是云南省地道藥材及《中華人民共和國藥典》2005年版收載藥物。
2 白芨培育現(xiàn)狀
目前,白芨繁殖方式主要有2種:種子繁殖、分株繁殖。野生白芨種子非常細小,千粒重僅為0.005 6 g,缺乏營養(yǎng),常規(guī)播種育苗出苗率低,生長緩慢。有的采用分株繁殖,分株繁殖雖然速度快、繁殖系數(shù)高,但是繁殖原材料耗費較多,難以適應大規(guī)模生產(chǎn)的需要。
自新世紀以來,國家把傳統(tǒng)的種植、養(yǎng)殖業(yè)與現(xiàn)代化生產(chǎn)質量管理規(guī)范(Good Agricultural Practice,GAP)相結合,加速了我國傳統(tǒng)中藥現(xiàn)代化生產(chǎn)管理。2002年7月我國正式頒布《中藥材生產(chǎn)質量管理規(guī)范》(GAP),2003年9月頒布《認證管理辦法》(試行)和《中藥材GAP認證檢查評定標準》(試行)。此規(guī)范即大家平時所說的中藥材GAP(GAP for Traditional Chinese Medicine)。自提出中藥材GAP技術概念以來,國內眾多中藥材生產(chǎn)基地、相關專業(yè)高職院校、科研院所和制藥企業(yè)就踏上了探索實施中藥材GAP之路。從2003年11月1日起國家食品藥品監(jiān)督管理局已正式受理中藥材GAP認證申請。中藥材GAP技術不僅能繼承發(fā)揚傳統(tǒng)的種植、養(yǎng)殖技術和經(jīng)驗,而且可使按規(guī)范生產(chǎn)出的中藥材達到“優(yōu)質、高產(chǎn)、穩(wěn)定、可控”的要求,使中藥材走出國門,縮小與國外發(fā)達國家之間的差距。因此,白芨開展GAP技術栽培生產(chǎn)具有重大意義。而白芨組織培養(yǎng)是白芨GAP栽培種植的前提,所以白芨組織培養(yǎng)是目前及將來最佳的一種繁殖方式[2]。
3 白芨組織培養(yǎng)技術
3.1 外植體的選擇
外植體選擇健康白芨種子。
3.2 培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件
、贌o菌萌發(fā)的培養(yǎng)基為Kundson和MS培養(yǎng)基;②愈傷組織誘導培養(yǎng)基為MS+2,4-D 1.1 mg/L+KT 0.12 mg/L;③分化培養(yǎng)基為MS+KT 2.04 mg/L;④生根培養(yǎng)基為MS+IBA 2.05 mg/L+NAA 1.84 mg/L。分化形成苗后連續(xù)光照。培養(yǎng)基均添加蔗糖22 g、瓊脂8 g[3]。
3.3 培養(yǎng)方法
首先,種子采集于成熟而未開裂的蒴果,外果皮常規(guī)消毒,在無菌狀態(tài)下取出種子,接種于Kundson培養(yǎng)基上,30 d后可直接形成幼苗。
其次,種子萌發(fā)后,在②號愈傷組織誘導培養(yǎng)基上快速形成白色或淡綠色的愈傷組織。
然后,叢生芽體的分化將上述愈傷組織轉入分化培養(yǎng)基③上,12~16 d后出現(xiàn)大量叢生芽體,光照后叢生芽轉變?yōu)榫G色,并可不斷增殖。
再次,生根培養(yǎng)將叢生芽體切割后轉接到④號生根培養(yǎng)基上,可長出粗壯根系,如將愈傷組織轉入MS基本培養(yǎng)基中也可以分化出芽體和根系,但是生長速度緩慢,一粒種子經(jīng)過上述多次轉移培養(yǎng),可獲得大量植株,每株3~5枚葉片。
最后,試管苗移栽。白芨組培苗在培養(yǎng)瓶中長至4~6 cm,可出瓶練苗。為使試管苗適應新的自然環(huán)境,要將試管苗放在溫室內煉苗4~6 d,以提高小苗的抗病能力。白芨練苗苗床pH值呈弱酸性,一般要求為5.8~6.8。移栽基質可以使用天然腐殖質,或35%珍珠巖+蛭石35%+泥炭15%+無菌壤土15%,只要管理到位,成活率可達90%。栽苗前,可用高錳酸鉀1 000倍液噴灑消毒[4]。
4 白芨組培苗GAP栽培技術要點
4.1 凈苗
出瓶取苗要操作規(guī)范,否則根部受損將嚴重影響成活率。開瓶后向瓶內注入1/3清水,搖晃使白芨苗與營養(yǎng)液分開后,將瓶內苗和營養(yǎng)液一起倒入洗苗盆內,用清水沖洗干凈苗根部的營養(yǎng)液。若清洗不干凈,用小刷輕刷后用清水沖洗干凈,將洗干凈的苗根部進行消毒。不能用手直接搓揉苗根部。如果苗根部有部分交纏,不可強行分開,以免拉扯造成傷口感染,整體栽種即可。
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