【摘 要】裸花紫珠為海南地道藥材，主要應(yīng)用于治療化膿性炎癥、急性傳染性肝炎、呼吸道及消化道出血、創(chuàng)傷出血等癥，外用治燒、燙傷及外傷出血等，收載于中國(guó)藥典1977年版一部，其標(biāo)準(zhǔn)缺乏監(jiān)控指標(biāo)；本課題主要是通過(guò)對(duì)裸花紫珠藥材的鑒別、檢查和含量測(cè)定指標(biāo)的研究，為建立裸花紫珠藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。
　　【關(guān)鍵詞】裸花紫珠 顯微特征 TLC鑒別 含量測(cè)定
　　裸花紫珠為馬鞭草科植物裸花紫珠 Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.的干燥葉和帶葉的嫩枝，主產(chǎn)于我國(guó)海南，為海南道地藥材，我國(guó)廣東、廣西也有分布。國(guó)外主要分布于印度、越南和馬來(lái)西亞。其根、葉可入藥，有抗菌止血，消炎解毒，散瘀消腫，驅(qū)風(fēng)祛濕之功效[1]。
　　裸花紫珠臨床主要應(yīng)用于治療化膿性炎癥、急性傳染性肝炎、呼吸道及消化道出血、創(chuàng)傷出血等癥，外用治燒、燙傷及外傷出血等[1]。近年來(lái)，裸花紫珠的抗炎、抗腫瘤、抗氧化、抗病毒性的作用已日益引起人們的重視[2]。所以對(duì)裸花紫珠進(jìn)行進(jìn)一步質(zhì)量研究是非常必要的。
　　本實(shí)驗(yàn)在顯微鑒別、TLC薄層鑒別、總灰分和酸不溶物的檢測(cè)以及紫外分光光度法測(cè)定總黃酮含量等方面進(jìn)行探討，對(duì)進(jìn)一步建立裸花紫珠藥材的質(zhì)量控制方法提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　1 儀器與試藥
　　1.1 儀器
　　OLYMPUS CX41RF 型顯微鏡（制造廠日本OLYMPUS）、Mettler AE-240電子分析天平（，METTLER公司生產(chǎn)）、CAMAG REPROSTAR 3薄層攝像儀（CAMAG）、UV-2450型紫外-可見分光光度計(jì)（島津公司）。
　　基金項(xiàng)目：海南產(chǎn)學(xué)研一體休專項(xiàng)資金項(xiàng)目（NO：CXY20140014）
　　作者簡(jiǎn)介：馮志強(qiáng)（1983），女（漢族），現(xiàn)碩士學(xué)位，主要從事中藥研究工作。
　　通訊作者簡(jiǎn)介：陳國(guó)彪（1962.），男（漢族），副主任藥師，主要從事中藥檢驗(yàn)研究工作。
　　1.2 試劑
　　水合氯醛試液、甘油試液
　　硅膠 G （批號(hào) 080715 ）青島海洋化工有限公司，自制規(guī)格為 10×20 cm，厚0.5 mm；
　　預(yù)制硅膠板（批號(hào) 20081025），10 ×10cm，10×20cm，厚 0.20-0.25mm，青島海洋化工廠分廠。
　　其他所用試劑均為分析純。
　　1.3 樣品 （藥材及其來(lái)源）
　　現(xiàn)有裸花紫珠藥材3批樣品。樣品批號(hào)、產(chǎn)地及來(lái)源見下表1：
　　2 性狀
　　本品常皺縮卷曲，展開后呈卵狀披針形或矩圓形，長(zhǎng)10～25cm，寬4～8cm；全緣或邊緣有疏齒。上表皮黑色，下表面密被濃厚的黃褐色星狀毛。側(cè)脈羽狀，小脈近平行與側(cè)脈幾成直角。葉柄長(zhǎng)1～2.5cm，被星狀毛。氣微香，味澀，微苦。
　　3 鑒別
　　3.1藥材的顯微鑒別
　　3.1.1藥材的橫切片制片
　　結(jié)果見圖1、圖2：
　　3.1.2藥材的粉末制片
　　結(jié)果見圖3：
　　3.1.3實(shí)驗(yàn)結(jié)論
　　本品葉橫切面：上下表皮均為1列細(xì)胞，外均被腺毛，非腺毛和腺鱗，以下表皮較多；上表皮下方有一列較大的下皮細(xì)胞。柵欄組織為1～2列細(xì)胞；海綿組織細(xì)胞小，排列較緊密。主脈維管束外韌型，呈馬蹄狀環(huán)，韌皮部有纖維群，主脈上下表皮內(nèi)側(cè)均有數(shù)列厚角細(xì)胞。薄壁細(xì)胞含草酸鈣簇晶或方晶。
　　粉末灰棕色。非腺毛有四種：一種為迭生星狀毛，大多碎斷，中樞直徑18～30μl，壁厚，非木化，完整者1～10余輪，每輪側(cè)生1～7個(gè)側(cè)生細(xì)胞；另一種1～4個(gè)細(xì)胞，末端有分叉，壁薄。腺毛頭部4個(gè)細(xì)胞，直徑22～27μm，柄1～2個(gè)細(xì)胞。上皮細(xì)胞多角形，壁略呈連珠狀增厚。
　　3.2藥材的薄層鑒別
　　3.2.1供試品溶液的制備
　　取本品5g，加H2O100ml，煎煮，保持微沸1小時(shí)，放冷，用脫脂棉濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)�加甲�?0ml使溶解，濾過(guò)，濾液加中性氧化鋁（100～200目）2g，攪拌均勻，濾過(guò)，濾液置水浴鍋上蒸干，殘?jiān)�加甲�?ml使溶解，作為供試品溶液。
　　3.2.2對(duì)照品溶液的制備
　　另取裸花紫珠對(duì)照藥材5g，同法制成對(duì)照藥材溶液。
　　3.2.3薄層層析
　　照薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一0.5%氫氧化鈉溶液制成的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯—甲醇—濃氨水（17：2：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%三氯化鋁乙醇試液，在105℃烘10分鐘，立即置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
　　3.2.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖4：
　　4 檢查
　　參照2005年版《中國(guó)藥典》一部附錄ⅨK灰分測(cè)定法 [6]，對(duì)藥材進(jìn)行總灰分和酸不容性灰分測(cè)定
　　4.1 總灰分
　　測(cè)定用的供試品須粉碎，使能通過(guò)二號(hào)篩，混合均勻后，取供試品2～3g（如需測(cè)定酸不容性成分，可取供試品3～5g），置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量（精確至0.01g），緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全灰化時(shí)，逐漸升高溫度至500～600℃，使完全灰化并至恒重。根據(jù)殘?jiān)�重量，�?jì)算供試品中總灰分胡含量（%）。
　　如供試品不易灰化，可將坩堝放冷，加熱水或10%硝酸銨溶液2ml，使殘?jiān)鼭駶?rùn)，然后至水浴鍋上蒸干，殘?jiān)�照前法熾灼，至坩堝�?nèi)容物完全灰化。測(cè)定結(jié)果見表2：
　　計(jì)算公式：熾灼殘?jiān)��?）=（灼燒后含樣坩堝重 - 空坩堝重）/樣品重* 100%
　　4.2 酸不溶性灰分
　　取上項(xiàng)所得灰分，在坩堝中小心加入稀鹽酸約10ml，表面皿用熱水5ml沖洗，洗夜并入坩堝中，用無(wú)灰濾紙濾過(guò)，坩堝內(nèi)的殘?jiān)�用水洗于濾紙上，并洗滌至洗液不在顯氯化物為止。濾渣連同濾紙移至同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。根據(jù)殘?jiān)�重量，�?jì)算供試品中酸不容性灰分的含量（%）。測(cè)定結(jié)果見表3：

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