[摘要]目的 建立燈盞細辛的薄層色譜鑒別方法。方法 采用適當的方法提取燈盞細辛中的4種有效成分即3，5-O-二咖啡酰奎寧酸、野黃岑苷、1，3-O-二咖啡�？鼘幩岷涂Х人�，鑒別時采用薄層色譜進行。結果 在供試品溶液的薄層色譜圖上出現與對照藥材溶液、對照品溶液色譜相應位置上相同顏色的斑點。結論 薄層色譜操作簡便、專屬性強，可用于燈盞細辛藥材的定性鑒別。
　　[關鍵詞]燈盞細辛；薄層色譜；鑒別
　　[中圖分類號]R284 [文獻標識碼]A [文章編號]1674-0742（2014）03（a）-0134-02
　　燈盞細辛是一種傳統的中藥材，為菊科飛蓬屬短葶飛蓬的干燥全草，又名燈盞花，主要分布在我國的云南、廣西、貴州、四川等西南地區(qū)，其中有98%左右分布在云南[1]。燈盞花具有消炎止痛、祛風除造詞濕、活血化瘀、驅寒解表、通經活絡的作用，自20世紀70年代開始廣泛的應用于臨床，主要用于冠心病、心絞痛、缺血性心腦血管疾病[2-3]。目前，燈盞花在老年糖尿病、癡呆等疾病的治療方面也得到了一定的肯定。隨著對燈盞細辛有效成分的不斷深入研究，發(fā)現除了黃酮類的野黃岑苷具有良好的藥效外，燈盞細辛中的咖啡酸酯類及酚酸類化合物也是不可忽視的活性成分，這些化合物不僅具有良好的抗氧化活性，同時還具有一定的擴張血管和抑制血栓形成的作用，且活性與野黃芩苷相當[4]。因此，全面評價燈盞細辛藥材質量是一項非常有意義的工作[5]，為了有效鑒別燈盞細辛中的多種有效成分，該研究于2012年10月—2013年6月采用薄層色譜法鑒定此藥材的野黃岑苷、3，5-O-二咖啡�？鼘幩�、咖啡酸和1，3-O-二咖啡�？鼘幩�，以為其質量控制及評價提供參考和依據。
　　1 儀器與試藥
　　1.1 儀器
　　全自動薄層鋪板器，超級循環(huán)水箱，臺式超聲波清洗器，1/10萬分析天平。
　　1.2 試藥
　　硅膠G薄層板；聚酰胺薄膜；3，5-O-二咖啡酰奎寧酸對照品、野黃芩苷對照品、1，3-O-二咖啡�？鼘幩釋φ掌贰⒖Х人釋φ掌�、燈盞細辛對照藥材，燈盞細辛藥材，其他所用試劑均為分析純。
　　2 方法
　　2.1. 對照品溶液的配制
　　對照品溶液1：稱取3，5- O-二咖啡�？鼘幩釋φ掌�5 mg，置于10 mL的容量瓶中，加適量甲醇溶解后，繼續(xù)加甲醇定容至刻度，搖勻，即得對照品溶液1，于冰箱中冷藏保存，備用。
　　對照品溶液2：稱取野黃芩苷對照品、咖啡酸對照品、1，3-O-二咖啡�？鼘幩釋φ掌犯�10 mg，置于5 mL容量瓶中，加適量甲醇溶解后，繼續(xù)加甲醇定容至刻度，搖勻，即得對照品溶液2，于冰箱中冷藏保存，備用。
　　2.2 供試品溶液的配制
　　供試品溶液1：取燈盞細辛粉末0.5 g，加甲醇10 mL，加熱回流30 min，濾過，蒸干濾液，將3滴鹽酸加入到殘渣中，再將8 mL乙酸乙酯加入其中，超聲處理5 min，濾過，蒸干濾液，加1 mL甲醇溶解殘渣，即得供試品溶液1。
　　供試品溶液2：取燈盞細辛粉末1 g，加0.2%的碳酸氫鈉溶液10 mL，浸泡過夜，濾過，用稀硫酸調濾液pH至3.0， 將無水甲醇20 mL加入，加熱回流30 min，濾過，蒸干濾液，加10 mL 水溶解殘渣，用5 mL正丁醇振搖提取，蒸干正丁醇液，加1 mL甲醇溶解殘渣，即得供試品溶液2。
　　2.3 對照藥材溶液的配制
　　對照藥材溶液1：取燈盞細辛對照藥材0.5 g，按供試品溶液1的方法制備，即得。
　　對照藥材溶液2：取燈盞細辛對照藥材1.0 g，按供試品溶液2的方法制備，即得。
　　2.4 陰性對照品溶液的配制
　　不加供試品，分別按照供試品溶液1和2的方法制備，得陰性對照品溶液1和2。
　　2.5 薄層色譜的點樣、展開及處理[6]
　　鑒別一：分別精密量取上述供試品溶液1以及對照品藥材溶液1各5 μL，對照品溶液1取2 μL，陰性對照品溶液1取5 μL，點在同一硅膠薄層板上，展開劑為甲苯-乙酸乙酯-甲酸（1∶7∶1），展距8 cm，取出后，晾干。噴上1%的Fecl3乙醇溶液，在日光下檢視，見圖1。
　　鑒別二：吸取上述對照藥材溶液2、供試品溶液2各2 μL，陰性對照品溶液2取2 μL，對照品溶液2取1 μL，分別點于同一聚酰胺薄膜上，展開劑為冰醋酸，展距8 cm，取出后，晾干。噴上1%的Fecl3乙醇溶液，在日光下檢視，見圖2。
　　3 結果
　　鑒別一：由圖1可以看出，在供試品溶液的薄層色譜圖中，于對照品溶液或對照藥材溶液的色譜圖相應的位置上，均存在相同顏色的斑點，且在相應的位置上陰性對照品溶液無斑點。
　　鑒別二：由圖2可知，在供試品溶液的薄層色譜圖中，于對照品溶液或對照藥材溶液的色譜圖相應的位置上，均存在相同顏色的斑點，且在相應位置上陰性對照品溶液無斑點。
　　4 討論
　　在該研究的薄層色譜鑒別預實驗中，曾將按樣品加三氯甲烷后的溶液、甲醇溶解的溶液以及樣品直接回流獲得的溶液進行索氏提取，加熱回流該3種提取液直至無綠色，然后除去三氯甲烷溶液，揮干溶劑，干燥藥渣，并連同濾紙一起轉移到具塞的錐形瓶中，加入30 mL甲醇并水浴回流1.5 h，過濾后，加2 mL甲醇使殘渣溶解，將獲得的溶液作為供試品溶液進行薄層色譜分析，結果未發(fā)現與對照品溶液相對應位置上的斑點。
　　除此之外，在進行鑒別一時，曾以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（2∶7∶1）為展開劑，但結果發(fā)現分離效果不夠明顯，故將展開劑比例調整為甲苯-乙酸乙酯-甲酸（1∶7∶1）；預實驗中，供試品溶液和對照藥材溶液的點樣量分別為10 μL和5 μL，發(fā)現點樣量為5 μL時，分離效果好且斑點清晰，因此最終確定供試品及對照藥材溶液的點樣量為5 μL，而3，5-O-二咖啡�？鼘幩釋φ掌啡芤旱狞c樣量在4和2 μL時，發(fā)現2 μL更合適，所以最終確定其點樣量為2 μL。
　　而鑒別二時，供試品溶液、對照藥材溶液和對照品溶液的初始點樣量均為0.5 μL，但結果發(fā)現斑點顏色較淺，不易區(qū)分。經試驗后，供試品溶液、對照藥材溶液、對照品溶液的點樣量最終分別確定為2 μL、2 μL和1 μL。同時在顯色時，由于對照品溶液2中1，3-O-二咖啡�？鼘幩崾軠囟鹊挠绊戄^大，其在較低溫時不顯色，因此可將其放置烘箱中加熱 1 min 后再進行顯色，且在進行鑒別二的過程中，應注意使展開后的薄層板保持干透。
　　綜上，該研究通過采用多種提取方法將燈盞細辛的有效成分提取分離并鑒別，操作可行，重復性好，準確度高，可作為燈盞細辛藥材的定性鑒別方法。
　　[參考文獻]
　　[1]劉勤， 張紅宇，王璐.燈盞花藥理作用研究進展[J].云南中醫(yī)中藥雜志， 2013， 34（2）： 61-64.
　　[2]劉俊.中藥飲片調劑中審方的作用分析與改進策略[J].中醫(yī)臨床研究， 2012， 4（2）： 44.
　　[3]甄君，孔梅，李振東，等.燈盞細辛注射液對急性腦梗死患者血清S100B蛋白表達及神經功能恢復的影響[J].中藥材，2011，34（10）：1642-1644.
　　[4]鄭林，喬希，黃勇，等.貴州產燈盞細辛藥材超高效液相指紋圖譜研究[J].時珍國醫(yī)國藥， 2011， 22（5）： 1117-1119.
　　[5]梅艷， 馮春， 李俊，等.HPLC 同時測定燈盞細辛合劑中 4 種有效成分的含量[J].中藥材， 2013（4）： 665-667.
　　[6]于玲，邱鵬.燈盞細辛藥材的薄層色譜鑒別[J].中國藥業(yè)， 2011， 20（16）：75-76.
　　（收稿日期：2013-11-10）

相關熱詞搜索：細辛 薄層 燈盞 色譜 鑒別