摘 要：為明確烤煙中下部葉采收次數(shù)對上部葉碳氮代謝、衰老進程及產(chǎn)質量的影響，以云煙87為試驗材料，設置4種中下部葉采收次數(shù)處理，對上部葉碳氮代謝關鍵酶及部分產(chǎn)物、抗衰老指標及相關酶、傷流液煙堿含量以及烤后煙葉經(jīng)濟性狀、常規(guī)化學成分及感官質量進行分析，結果表明，隨著中下部葉采收次數(shù)增加上部葉硝酸還原酶（NR）活性降低，氮同化代謝下降，超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化物酶（POD）、過氧化氫酶（CAT）等抗氧化酶活性降低，丙二醛（MDA）含量增加，葉片氧化衰老加劇，煙堿含量上升；中下部葉采收4次處理上部葉氮同化代謝較低，碳同化代謝較旺盛，烤后煙葉還原糖含量較高，糖堿比協(xié)調(diào)，感官質量評價及經(jīng)濟性狀較其他處理好。
　　關鍵詞：采收次數(shù)；碳氮代謝；抗氧化酶；煙堿
　　中圖分類號：TS44+1 文章編號：1007-5119（2018）06-0058-08 DOI：10.13496/j.issn.1007-5119.2018.06.009
　　烤煙是一種以收獲葉片為主的經(jīng)濟作物，打頂后葉片自下而上依次成熟、采收，一般每次采收1～3片，上部4～6片成熟一次采收，整株收獲結束采烤次數(shù)可達5～7次。采摘葉片對煙株是一種傷害脅迫[1-3]，引起煙株代謝改變，在自下而上收獲葉片過程中，不同的采收次數(shù)對煙株造成的傷害刺激不同，從而影響上部葉的質量。煙葉碳氮代謝是煙葉生長發(fā)育和產(chǎn)量、品質形成過程中最基本的代謝過程，與煙葉品質關系密切[4-5]。研究表明減少采收次數(shù)可提高工效、增加產(chǎn)值，降低上部煙葉的煙堿含量[6-8]，但采收次數(shù)對上部葉生長代謝的影響未見相關報道。本文通過設置4個中下部葉采收次數(shù)，研究采收損傷對上部葉片碳氮代謝、氧化脅迫的影響，探討采收損傷與上部葉衰老及烤后質量的關系，以期為烤煙合理采收、提升煙葉品質提供參考。
　　1 材料與方法
　　1.1 試驗材料
　　試驗于2017年在恩施州利川市柏楊鎮(zhèn)進行，供試品種為云煙87，土壤為砂壤土，有機質2.39%，pH為5.91，速效氮91.00 mg/kg，有效磷49.34 mg/kg，速效鉀158.00 mg/kg。施肥量純氮90 kg/hm2，m（N）∶m（P2O5）∶m（K2O）=1∶1.5∶2.5，行距1.2 m，株距0.55 m。其他技術措施和田間管理按優(yōu)質煙生產(chǎn)技術措施實施。
　　1.2 試驗設計
　　移栽后70 d打頂同時進行底部不適用煙葉處理，各處理留葉數(shù)均為16片，其他田間操作保持一致，盡量避免其他機械損傷。設置中下部葉采收3次（T1）、4次（T2）、5次（T3）、6次（T4）4個處理，之后上部4片葉一次性采收（表1）。3次重復，共12個小區(qū)，隨機排列，每小區(qū)4行，每行20株。
　　1.3 測定項目及方法
　　上部葉采收前（移栽后120 d）各小區(qū)隨機選取3株將頂部兩片葉片采回，用蒸餾水洗凈，擦干，去除主脈，沿主脈將葉片剪為兩部分，一半用于生理指標測定，轉化酶（invertase，INV）、吲哚乙酸氧化酶（indoleacetic acid oxidase，IAAO）采用上海索橋生物科技有限公司試劑盒測定，硝酸還原酶
　�。╪itrate reductase，NR）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、過氧化物酶（peroxidase，POD）、過氧化氫酶（catalase，CAT）等酶活性及過氧化氫（H2O2）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定；另一部分于105 ℃殺青，80 ℃烘干至恒質量并研磨粉碎過250 μm篩，制成殺青樣品，采用美國API公司生產(chǎn)的305D型連續(xù)流動分析儀測定還原糖、總糖、煙堿、總氮含量，測定方法參照行業(yè)標準[9-11]進行。
　　傷流液收集：上部葉采收當天下午用刀將根部以上10 cm左右的莖部割斷，用經(jīng)過洗滌烘干處理的脫脂棉包住莖的斷面以吸收流出的傷流液，并用保鮮膜將脫脂棉包裹，用皮筋固定在煙莖上，第2天下午將脫脂棉取出后用注射器將傷流液擠入離心管中，低溫保存，測定煙堿含量。
　　產(chǎn)值計算：各小區(qū)煙葉經(jīng)三段五步式烘烤工藝進行烘烤后經(jīng)回潮，按GB/T2635—1992要求進行烤煙分級，計算產(chǎn)值。
　　常規(guī)化學成分檢測：每小區(qū)烤后隨機選取C3F、B2F葉片20片剔除主脈和較粗的支脈，粉碎過250 μm篩，用于常規(guī)化學成分測定。
　　感官品質鑒定：各處理隨機選取B2F葉片20片用于感官品質鑒定，由湖北中煙工業(yè)有限責任公司技術研發(fā)中心進行評價。具體評分標準見表2。
　　1.4 數(shù)據(jù)處理
　　所有試驗數(shù)據(jù)均通過Microsoft Office Excel 2016和SPSS 19.0軟件進行方差分析，顯著性分析采用Ducan法，相關分析采用Pearson簡單相關分析。
　　2 結 果
　　2.1 采收次數(shù)對上部葉碳氮代謝的影響
　　2.1.1 對碳氮代謝關鍵酶活性的影響 NR是植株氮代謝的關鍵酶，反映了氮代謝水平。由圖1可以看出，隨著中下部葉采收次數(shù)的增加，上部煙葉NR活性呈下降的趨勢，中下部葉采收6次與采收3次相比NR活性降低76.98%，可見增加中下部葉采收次數(shù)可降低上部葉氮代謝運轉速度，減少氮的同化，采收次數(shù)超過3次NR活性顯著降低。從圖2可知，INV活性隨著中下部葉采收次數(shù)的增加呈先上升后下降的趨勢，采收6次上部葉INV活性顯著降低。說明適當?shù)闹邢虏咳~采收次數(shù)有利于上部葉光合產(chǎn)物蔗糖的轉化積累，以4次左右為宜。
　　2.1.2 對部分碳水化合物、含氮化合物含量的影響 對上部葉殺青樣部分化學成分進行分析（表3）可知，增加中下部葉采收次數(shù)，還原糖、總糖等部分碳水化合物含量呈下降趨勢；總氮含量呈逐漸降低的趨勢，煙堿含量增幅較大。當中下部葉采收3次，上部葉總糖、還原糖含量較高，煙堿含量較低，化學成分較協(xié)調(diào)；采收6次時，上部葉還原糖含量顯著降低，煙堿含量顯著增加，不利于上部葉質量的形成。

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