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血清MicroRNA—122作為膿毒癥診斷特異性標(biāo)志物的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-23 來源: 感悟愛情 點(diǎn)擊:


  【摘要】 目的 觀察膿毒癥患者的血清中MicroRNA-122的表達(dá)量在病程中的動(dòng)態(tài)變化情況, 并且對(duì)此變化情況與膿毒癥的發(fā)病程度之間關(guān)系進(jìn)行探討。方法 選取88例膿毒癥患者作為觀察組, 其中一般膿毒癥患者40例作為一般膿毒癥組、重癥膿毒癥患者48例作為重癥膿毒癥組;另選同期88例體檢健康人作為對(duì)照組, 采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)對(duì)對(duì)照組入組時(shí)及觀察組入組第1、3、5、7、14天血清中MicroRNA-122的表達(dá)量進(jìn)行檢測, 觀察所有研究對(duì)象MicroRNA-122表達(dá)情況, 并比較觀察組中不同組別的臨床資料差異。結(jié)果 重癥膿毒癥組序貫器官衰竭評(píng)定量表(SOFA)評(píng)分(9.7±
  3.4)分、急性生理學(xué)與慢性健康狀況評(píng)估Ⅱ(APECHEⅡ)評(píng)分(18.9±6.5)分明顯高于一般膿毒癥組的(7.1±2.0)、(13.9±5.2)分, 慢性腎臟疾病發(fā)生率37.50%明顯高于一般膿毒癥組的12.50%, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察組入組第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表達(dá)量均明顯低于對(duì)照組, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。同時(shí)間, 重癥膿毒癥組患者血清miRNA-122表達(dá)量均明顯高于一般膿毒癥組, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 血清中MicroRNA-122的表達(dá)量可以作為膿毒癥診斷的特異性標(biāo)志物, 還能夠?qū)δ摱景Y患者的疾病嚴(yán)重程度做出預(yù)警, 具有推廣應(yīng)用的價(jià)值。
  【關(guān)鍵詞】 血清MicroRNA-122;膿毒癥;診斷特異性標(biāo)志物;研究
  DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.12.024
  膿毒癥是一種由于受到一些微生物感染所導(dǎo)致的臨床綜合癥, 如果不能及時(shí)發(fā)現(xiàn), 及時(shí)治療, 就有可能發(fā)展成膿毒癥休克, 甚至?xí)够颊叩亩鄠(gè)器官出現(xiàn)功能性障礙[1, 2]。所
  以, 作者選擇了對(duì)膿毒癥患者血清中MicroRNA-122的表達(dá)量的動(dòng)態(tài)變化情況進(jìn)行觀察, 從而進(jìn)一步探討了此變化情況與膿毒癥的發(fā)病程度之間的關(guān)系。具體報(bào)告如下。
  1 資料與方法
  1. 1 一般資料 選取2015年10月~2017年10月在本院進(jìn)行治療的88例膿毒癥患者作為觀察組, 其中一般膿毒癥患者40例作為一般膿毒癥組、重癥膿毒癥患者48例作為重癥膿毒癥組;另選同期88例體檢健康人作為對(duì)照組。觀察組年齡19~85歲, 平均年齡(55.4±18.6)歲。對(duì)照組年齡22~81歲,
  平均年齡(57.2±17.1)歲。觀察組與對(duì)照組年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 有可比性。
  1. 2 方法
  1. 2. 1 實(shí)驗(yàn)主要儀器與試劑 儀器:MJ-Mini梯度PCR儀;試劑:mir Vana miRNA提取試劑盒、miRccute miRNA cDNA第一鏈合成試劑盒、熒光定量檢測試劑盒;系統(tǒng):實(shí)時(shí)熒光定量檢測系統(tǒng) [3]。
  1. 2. 2 數(shù)據(jù)采集 對(duì)觀察組患者的姓名、年齡、性別、病史等做好詳細(xì)的記錄;颊呷朐汉蟮牡1天對(duì)患者的具體病情進(jìn)行估計(jì)并且做出評(píng)分[2]。將對(duì)照組的姓名、性別、年齡等基本信息也做好詳細(xì)記錄。
  1. 2. 3 PNA提取和逆轉(zhuǎn)錄(RT)-PCR 對(duì)所有研究對(duì)象采靜脈外周血, 其中對(duì)照組入組時(shí)采血, 觀察組入組第1、3、5、7、14天采血。將血液中血清分離出來放在-80℃的冰箱內(nèi)保存, 等待測量。按照mirVana miRNA試劑盒對(duì)血清中的總RNA進(jìn)行提取。對(duì)提取出來的總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄, 隨后對(duì)RT的反應(yīng)體系進(jìn)行配制, 將配制好的反應(yīng)體系搖勻后再反轉(zhuǎn)錄(具體操作步驟可以參照試劑盒的使用說明書)。根據(jù)PCR試劑盒的說明書對(duì)PCR的反應(yīng)體系進(jìn)行確定 [4]。
  1. 3 觀察指標(biāo) ①比較觀察組中不同組別的臨床資料差異, 指標(biāo)包括SOFA評(píng)分、APECHEⅡ評(píng)分、慢性腎臟病發(fā)生
  情況。②比較對(duì)照組與觀察組不同時(shí)間血清MicroRNA-122表達(dá)情況的差異。③一般膿毒癥組與重癥膿毒癥組相同時(shí)間點(diǎn)血清MicroRNA-122表達(dá)情況的差異。
  1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。正太分布計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 采用t檢驗(yàn);非正態(tài)分布的計(jì)量資料采用中位數(shù)(四分位數(shù))表示, 采用Mann-Whitney U檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  2 結(jié)果
  2. 1 一般膿毒癥組與重癥膿毒癥組臨床資料比較 重癥膿毒癥組SOFA評(píng)分(9.7±3.4)分、APECHEⅡ評(píng)分(18.9±
  6.5)分明顯高于一般膿毒癥組的(7.1±2.0)、(13.9±5.2)分, 慢性腎臟疾病發(fā)生率37.50%明顯高于一般膿毒癥組的12.50%, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。
  
  2. 2 觀察組與對(duì)照組血清miRNA-122表達(dá)量比較 觀察組入組第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表達(dá)量均明顯低于對(duì)照組, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。
  
  2. 3 一般膿毒癥組與重癥膿毒癥組血清miRNA-122表達(dá)量比較 同時(shí)間, 重癥膿毒癥組患者血清miRNA-122表達(dá)量均明顯高于一般膿毒癥組, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

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