烤煙煙葉胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶分離條件的優(yōu)化
發(fā)布時(shí)間:2019-08-24 來(lái)源: 感悟愛(ài)情 點(diǎn)擊:
摘要:通過(guò)不同流動(dòng)相、測(cè)定溫度、流速的對(duì)比,優(yōu)化了分離煙葉總DNA中胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的高效液相色譜法?緹煙熑~DNA采用CTAB法提取,高氯酸水解,用KOH調(diào)節(jié)pH到3-5,取上清液測(cè)定。色譜柱為Nucleosil C18(250mm×4.6mm,5μm)。優(yōu)化后測(cè)定條件為:流動(dòng)相采用甲醇:5mmol/L戊烷磺酸鈉(10:90,V/V),流速0.7ml/min,柱溫30℃,檢測(cè)波長(zhǎng)273nm,進(jìn)樣量20μl。該方法簡(jiǎn)化了流動(dòng)相的配制,縮短了分離時(shí)間,胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的加標(biāo)回收率分別為103.50%和96.67%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.35%和2.80%。用該方法研究烤煙煙葉發(fā)育過(guò)程中總DNA胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的含量,效果良好,符合煙葉生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律。
關(guān)鍵詞:反相高效液相色譜;烤煙煙葉;5-甲基胞嘧啶;胞嘧啶
中圖分類號(hào):S572-34 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào):A 文章編號(hào):1001-4942(2010)06-0094-04
熱點(diǎn)文章閱讀