1例Rh弱D15型的血清學及基因定型研究
發(fā)布時間:2018-06-23 來源: 感恩親情 點擊:
中圖分類號:R394 文獻標識碼:B DOI:10.3969/j.issn.1006-1959.2018.05.071
文章編號:1006-1959(2018)05-0189-02
Rh血型系統(tǒng)中D抗原免疫原性最強,是臨床上引起溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病的重要抗原。D抗原除了正常的D抗原外,還存在多種變異型:部分D、弱D和DEL。在臨床輸血工作中,極少能發(fā)現(xiàn)RhD變異型的患者,現(xiàn)報告如下。
1材料與方法
1.1一般資料 患者男性,77歲,2016年9月住院檢查出肺陰影,術(shù)前做血型鑒定,在我科用戴安娜血型卡常規(guī)做血型后由第二個工作人員復(fù)核血型時發(fā)現(xiàn)RhD表達偏弱的,送本地血液中心血型室確認此患者的RhD血型,其采用血清學方法和分子生物學方法檢測出此患者為RhD變異型。
1.2試劑與儀器 選用抗-D試劑 1號IgM抗-D單克隆抗體(上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司,批號:20151816);2號戴安娜微柱凝膠血型卡(批號:15023.02);3號IgM+IgG 抗-D(Milli-pore,批號:BMG-1102A);戴安娜Coombs卡(批號:15143.01);全血 DNA 提取試劑盒: 購自 TIANGEN;人類紅細胞 RhD 陰性鑒定基因檢測試劑盒(PCRSSP): 購自天津秀鵬生物技術(shù)開發(fā)有限公司;Baso 2005-2醫(yī)用低溫離心機;戴安娜WADIANA-COMPACT全自動配血及血型分析儀。
1.3方法 ①血清學方法:IgM抗-D用試管法和血型卡,IgG抗-D用Coombs卡,按試劑使用說明書操作。②DNA提取: 按全血 DNA提取試劑盒試劑使用說明書操作。③RhD 基因檢測: 按人類紅細胞 RhD 陰性鑒定基因檢測試劑盒使用說明書操作, 根據(jù)結(jié)果格局判定結(jié)果。
2結(jié)果
2.1試管法IgM抗-D強度為3+(混合凝集外觀)。
2.2血型卡IgM抗-D強度為3+。
2.3 IgG抗-D強度為4+。
2.4 PCR-SSP 凝膠成像檢測,結(jié)果判定,為弱D15型,見表1。
3討論
在紅細胞35個血型系統(tǒng)中,Rh血型系統(tǒng)是最具復(fù)雜性和多態(tài)性的血型系統(tǒng),在輸血醫(yī)學中的重要性僅次于ABO血型系統(tǒng)[1]。Rh血型系統(tǒng)抗原總數(shù)約有45種之多,主要抗原有D、C、E、c和e五種抗原,由于D抗原的抗原性最強,具有高免疫性而最具臨床意義[2]。近年來通過研究發(fā)現(xiàn),RhD抗原分為D陽性、D陰性和D變異型。D變異型又可分為:①部分D(partial D):D抗原表達不完整,其質(zhì)量發(fā)生變異,和某些抗D試劑不發(fā)生凝集反應(yīng)。②弱D(week D):D抗原表達完整但是強度減弱,由RhD基因編碼區(qū)堿基突變造成。③DEL型:極弱表達的D抗原,且質(zhì)量也發(fā)生變化,只有通過吸收放散的方法才能檢測到,稱為DEL抗原。
以前的觀點認為RhD變異型人群作為受血者應(yīng)視為RhD陰性,輸RhD陰性紅細胞[2]。但是,進一步了解了RhD血型基因的分子生物學基礎(chǔ)后,得知應(yīng)根據(jù)RhD變異型不同的發(fā)生機制選擇不同的輸血方案,已達到節(jié)約RhD陰性血液資源的目的。RhD變異型的產(chǎn)生原理有:①基因交換:由于RhD基因和RhCE基因在Rh座位上方向相反,兩個同源基因之間容易發(fā)生交換,即部分D。②堿基變異:包括突變、缺失、mRNA拼接位點變異等,若在剪切點周圍發(fā)生突變往往是DEL型,蛋白編碼區(qū)突變往往是弱D發(fā)生的分子機制。對于RhD變異型個體,既要警惕他們的血液可能使受血者產(chǎn)生抗體,又要避免不加區(qū)分地一律給他們輸注陰性血液。有關(guān)RhD血型的輸血方案有如下總結(jié):①RhD陰性:即RhD全基因缺失者,作為受血者應(yīng)接受RhD全基因缺失的供血者血液;作為供血者可供血給任何RhD亞型的受血者;②部分D:即RhD部分基因被RhCE基因替換融合者,作為受血者應(yīng)接受RhD全基因缺失或相同部分D亞型的供血者血液;作為供血者可供血給相同部分D亞型和RhD陽性受血者;③弱D:弱D作為受血者可當作RhD陽性對待,接受RhD陽性血液,作為供血者應(yīng)當作RhD陽性對待;④DEL型:作為受血者可當作RhD陽性對待,接受RhD陽性血液,作為供血者應(yīng)當作RhD陽性對待。
為了避免RhD變異型的漏檢,采用DNA分型技術(shù)篩選檢測RhD變異型已成為一項輔助工具。傳統(tǒng)的血清學方法存在很多缺陷,如步驟復(fù)雜繁瑣;不同的商品化的抗D試劑與D抗原決定簇結(jié)合位點不同,即使對同一抗原決定簇反應(yīng),其結(jié)合能力也有差別[2];并且對人員操作經(jīng)驗要求高,就如我科這例RhD變異型患者,在首次判讀結(jié)果時漏檢而在復(fù)核結(jié)果時由另一人員發(fā)現(xiàn)。分子生物學方法可直接檢測RhD基因型,簡便快捷,可操作性強,結(jié)果準確。
本文中的患者手術(shù)順利,沒有輸血。理論上弱 D 因為只是抗原位點數(shù)減少,在輸入RhD陽性的血后不會產(chǎn)生抗-D 抗體,即不會造成再次輸血困難。
綜上所述,臨床上用血清學方法檢測出的RhD表達減弱,應(yīng)進一步采取分子生物學方法確定其基因型,以選擇合適的輸血方案,避免RhD陰性血液的浪費。
參考文獻:
[1]孫國棟,王曉平.Rh血型系統(tǒng)弱D及部分D研究進展[J].臨床輸血與檢驗,2007,9(2):183-185.
[2]師巧紅,樊紅.D變異型受血者輸RhD陰性血1例[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新,2012,09(20):123-124.
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