[摘要] 目的：比較道地、非道地黃芩的化學(xué)成分差異，研究產(chǎn)地、生長(zhǎng)方式（野生栽培）對(duì)藥材化學(xué)成分的影響，為黃芩道地藥材鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：采用HPLC指紋圖譜方法對(duì)不同產(chǎn)地及生長(zhǎng)方式的黃芩藥材中的化學(xué)成分進(jìn)行檢測(cè)，采用系統(tǒng)聚類分析、主成分分析及成分組峰面積模式對(duì)指紋譜數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　結(jié)果：道地藥材與非道地藥材指紋譜輪廓特征明顯不同�，F(xiàn)代道地產(chǎn)區(qū)河北承德的黃芩指紋譜除內(nèi)蒙古赤峰（現(xiàn)代非道地產(chǎn)區(qū)）的樣品指紋譜特征與其相似外明顯區(qū)別于其他產(chǎn)地；古代本草上所記載的黃芩產(chǎn)區(qū)甘肅慶陽，陜西延安，山東臨沂，山西長(zhǎng)治、晉中的黃芩樣品化學(xué)特征相似；現(xiàn)代非道地產(chǎn)區(qū)甘肅定西、隴南，陜西商洛的黃芩藥材指紋譜特征相似；野生黃芩的阿替苷含量高于栽培黃芩。
　　結(jié)論：利用指紋圖譜輪廓特征可對(duì)道地與非道地黃芩藥材進(jìn)行鑒別區(qū)分，該研究結(jié)果可為黃芩藥材質(zhì)量控制，以及道地與非道地黃芩藥材的藥性藥效研究提供參考依據(jù)。
　　中藥黃芩為唇形科植物貝加爾黃芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根，具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血安胎等功效^[1]，目前在我國(guó)北方大部分地區(qū)都有分布^[2]。現(xiàn)代藥理研究表明其主要活性成分為黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素等黃酮類化合物，具有解熱、抗炎、抗氧化等活性^[3]，而阿替苷等非黃酮類化合物具有神經(jīng)保護(hù)、改善記憶、抗細(xì)胞損傷等作用^[4-5]。
　　道地藥材指經(jīng)過中醫(yī)臨床長(zhǎng)期應(yīng)用優(yōu)選出來的，在特定地域，通過特定生產(chǎn)過程所產(chǎn)的，較在其他地區(qū)所產(chǎn)的同種藥材品質(zhì)佳、療效好，具有較高知名度的藥材�，F(xiàn)今習(xí)慣以河北承德為黃芩的道地產(chǎn)地[2， 6]，內(nèi)蒙古、山東、山西、甘肅、陜西等地也有較多黃芩生產(chǎn)。其中甘肅慶陽、陜西延安、山東一帶在唐代曾為道地產(chǎn)地，《圖經(jīng)本草》、《證類本草》中記載山西也有黃芩生產(chǎn)^[7-9]。
　　為控制黃芩藥材的質(zhì)量，學(xué)者們對(duì)不同產(chǎn)地^[10-12]、不同采收期^[13]、不同生長(zhǎng)發(fā)育期^[14]、不同生長(zhǎng)方式（栽培和野生）^[15]以及不同規(guī)格^[16]的黃芩藥材的指紋圖譜進(jìn)行了研究，并對(duì)藥材中的黃酮類成分進(jìn)行了定性定量分析^[17-20]。此外，肖蓉等^[21]還對(duì)河北道地藥材指紋圖譜進(jìn)行研究，用相似度評(píng)價(jià)和系統(tǒng)聚類分析的方法提出了道地藥材指紋圖譜模式。但道地與非道地黃芩藥材的化學(xué)差異尚不明確，通過指紋圖譜進(jìn)行黃芩產(chǎn)地鑒別尚無直接的參考依據(jù)。本課題組在對(duì)黃芩道地產(chǎn)地考證的基礎(chǔ)上，比較了來源于古代和現(xiàn)代的道地和非道地產(chǎn)地的黃芩的解熱和抗炎藥效，發(fā)現(xiàn)道地產(chǎn)區(qū)的黃芩樣品作用強(qiáng)于非道地產(chǎn)區(qū)的樣品，證明了黃芩存在道地性^[22]。為探討黃芩道地藥材的化學(xué)特征，本研究從我國(guó)北方主要產(chǎn)地收集了野生和栽培黃芩藥材共63份，進(jìn)行了HPLC指紋譜表征和比較，運(yùn)用主成分分析、聚類分析和成分組峰面積模式比較等方法分析數(shù)據(jù)，以期為黃芩道地藥材鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)提供參考依據(jù)。
　　1 材料
　　Agilent 1100 型高效液相色譜儀，配有二元泵、DAD檢測(cè)器、Agilent化學(xué)工作站；Phenomenex Gemini C₁₈色譜柱（4.6 mm× 250 mm， 5 μm）。
　　甲醇（色譜純，F(xiàn)isher公司），無水甲酸（分析純， 天津光復(fù)精細(xì)化工研究所），雙蒸水（娃哈哈飲用純凈水，杭州娃哈哈集團(tuán)）。提取用甲醇（分析純，北京化工廠）。黃芩苷（批號(hào)110715-200815）、黃芩素（批號(hào)111595-200905）和漢黃芩素（批號(hào)111541-200403）對(duì)照品均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；漢黃芩苷、千層紙素A苷、千層紙素A、阿替苷、白楊素-6-C-α-L-阿拉伯吡喃糖-8-C-β-D-葡萄吡喃糖苷、5，7，2′，6′-4羥基黃酮、粘毛黃芩素Ⅲ，是由北京大學(xué)藥學(xué)院天然藥物化學(xué)研究室制備，經(jīng)波譜方法鑒定結(jié)構(gòu)，并用HPLC測(cè)定純度均達(dá)到98%以上^[23]。
　　本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)藥材共計(jì)63份（表1），全部藥材經(jīng)北京大學(xué)藥學(xué)院生藥學(xué)研究室蔡少青教授鑒定為唇形科黃芩屬植物貝加爾黃芩S. baicalensis的干燥根，憑證標(biāo)本存放于北京大學(xué)藥學(xué)院生藥標(biāo)本室。
　　2 方法
　　2.1 供試品制備
　　采集的黃芩藥材去除雜質(zhì)，制成飲片并粉碎。粉碎后的黃芩樣品在低溫下干燥2 h，迅速精密稱定0.5 g，加入70%甲醇50 mL，室溫超聲提取30 min，靜置至澄清，上清液用0.45 μm微孔濾膜過濾，即得。
　　2.2 色譜條件
　　Phenomenex Gemini C₁₈色譜柱（4.6 mm ×250 mm，5 μm）。流動(dòng)相為1%甲酸溶液（A 相）和甲醇（B相）。梯度洗脫程序?yàn)?～10 min，20%～40%B；10～20 min，40%B；20～30 min，40%～46%B；30～45 min，46%B；45～50 min，46%～50%B；50～80 min，50%～80%B。流速1 mL·min^-1，檢測(cè)波長(zhǎng)274 nm，進(jìn)樣量10 μL；柱溫30 ℃，梯度洗脫。
　　2.3 色譜峰鑒定
　　利用對(duì)照品對(duì)黃芩藥材中黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、千層紙素A苷、千層紙素A、阿替苷、白楊素-6-C-α-L-阿拉伯吡喃糖-8-C-β-D-葡萄吡喃糖苷、5，7，2′，6′-四羥基黃酮、粘毛黃芩素Ⅲ10個(gè)成分進(jìn)行了指認(rèn)，并根據(jù)各成分的MS裂解規(guī)律和紫外吸收特征， 對(duì)黃芩指紋圖譜中其余的17個(gè)主要色譜峰進(jìn)行了MS鑒定^[24]。

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