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常規(guī)試管凝集試驗(yàn)與虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)布病抗體結(jié)果對(duì)比分析

發(fā)布時(shí)間:2018-07-02 來(lái)源: 短文摘抄 點(diǎn)擊:

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  本文的主要研究目的,是通過(guò)虎紅平板凝集試驗(yàn)以及常規(guī)試管凝集試驗(yàn)對(duì)布魯菌病進(jìn)行檢測(cè),并且分析對(duì)比兩者的檢測(cè)結(jié)果。在實(shí)際檢測(cè)的過(guò)程中,主要運(yùn)用試管凝集試驗(yàn)以及虎紅平板凝集試驗(yàn)這兩種方法。通過(guò)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果分析發(fā)現(xiàn),在四百份的高溫血清當(dāng)中,其中有十八份試管凝集試驗(yàn)陽(yáng)性,完全來(lái)自于三十六份的虎紅平板凝集試驗(yàn)的陽(yáng)性當(dāng)中。因此我們能夠得出,在對(duì)布魯菌病的實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中,應(yīng)用通過(guò)虎紅平板凝集試驗(yàn)進(jìn)行有效的篩選,所得到的陽(yáng)性樣品可以通過(guò)試管凝集試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行復(fù)核。
  所謂布魯菌病,通常也被人稱作布病或者波狀熱病。這種疾病主要是布魯菌所引發(fā)的,并且在世界范圍內(nèi)分布廣泛,人類與牲畜都會(huì)感染這種慢性的細(xì)菌性傳染疾病。布魯菌病在我國(guó)隸屬于二類牲畜疫病。在我國(guó)大多數(shù)布魯菌病發(fā)病率高的區(qū)域,國(guó)家頒布了2015年必須對(duì)該疾病進(jìn)行有效的控制,到了2020年必須徹底的清除該疾病。因此,對(duì)于布魯菌病陽(yáng)性高效的檢測(cè)手段,對(duì)該疾病的預(yù)防與醫(yī)治都有著至關(guān)重要的意義。疾病控制機(jī)構(gòu)通過(guò)運(yùn)用試管凝集試驗(yàn)方法以及虎紅平板凝集試驗(yàn)方法對(duì)四百例高危群體的樣品血清進(jìn)行檢測(cè)對(duì)比分析。其詳細(xì)的分析檢測(cè)報(bào)告結(jié)果如下。
  1 材料與方法
  1.1 材料
  在實(shí)際檢測(cè)的過(guò)程中,所使用的材料包括:試管凝集抗原試劑,虎紅平板凝集抗原試劑,并且都在有效期之間進(jìn)行使用。所檢測(cè)的血清樣品來(lái)自于四百例布魯菌疾病的高危群體。
  1.2 方法
  1.2.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBPT)
  在實(shí)際檢測(cè)的過(guò)程中,將需要進(jìn)行檢測(cè)的血清樣品,取出0.03mL,放置于玻片上,并且將0.03mL的虎紅平板抗原加入到其中,并且均勻混合,其判定結(jié)果將會(huì)在5min之內(nèi)產(chǎn)生。如果玻片上的混合物當(dāng)中產(chǎn)生顆粒狀的物質(zhì)或者產(chǎn)生凝集片,其檢測(cè)結(jié)果都為陽(yáng)性(+)。如果混合液體呈現(xiàn)出十分渾濁的狀態(tài),其檢測(cè)結(jié)果都為陰性(-)。
  1.2.2 試管凝集試驗(yàn)(SAT)
  在運(yùn)用該種方法進(jìn)行實(shí)際檢測(cè)的過(guò)程中,需要稀釋被檢測(cè)的血清樣品。對(duì)于每一份的血清樣品,需要使用五支小試管,將2.3mL生理鹽水加入到第一個(gè)試管當(dāng)中,對(duì)于第二個(gè)試管,不需要加入生理鹽水,接下來(lái)將0.5mL加入到第三個(gè)試管、第四個(gè)試管以及第五個(gè)試管當(dāng)中。之后,通過(guò)對(duì)1mL吸管的有效使用,將需要進(jìn)行檢測(cè)的0.2mL血清樣品吸入到其中,并且將其放置到第一個(gè)試管當(dāng)中,保證液體的均勻混合。在確定液體的均勻混合之后,繼續(xù)運(yùn)用此吸管來(lái)吸取第一個(gè)試管當(dāng)中的血清,并且將這些血清分別以0.5mL的容量加入到第二個(gè)試管與第三個(gè)試管當(dāng)中,并且保證第三個(gè)試管當(dāng)中的液體均勻混合。之后吸出0.5mL的第四試管液體,將其融入到第五個(gè)試管當(dāng)中,并且確保第五個(gè)試管當(dāng)中的液體均勻混合,然后取出0.5mL的第五試管液體并將其丟棄。通過(guò)對(duì)這些試管當(dāng)中的血清稀釋度進(jìn)行分析對(duì)比,我們發(fā)現(xiàn)第二個(gè)試管一直到第五個(gè)試管的稀釋度分別為1∶12.5、1∶25、1∶50、1∶100。在第二個(gè)試管以及第五個(gè)試管的稀釋血清檢測(cè)樣品當(dāng)中,分別將0.5mL的抗原稀釋液加入到其中。通過(guò)觀察發(fā)現(xiàn),血清樣品的稀釋度第二個(gè)試管一直到第五個(gè)試管的稀釋度分別為1∶25、1∶50、1∶100、1∶200。同時(shí)進(jìn)行抗原對(duì)照以及陽(yáng)性與陰性的對(duì)照,并且對(duì)判斷比濁管進(jìn)行制備。將所有的比濁管、對(duì)照管、試驗(yàn)管有效震蕩之后,將其放置到37℃的溫箱之內(nèi)二十二個(gè)小時(shí),將其取出在室溫的環(huán)境中放置兩個(gè)小時(shí),之后將比濁管作為判斷的重要依據(jù),進(jìn)行試驗(yàn)結(jié)果的判定。陽(yáng)性血清的診斷準(zhǔn)則:試管凝集反應(yīng)血清 1∶100 稀釋度凝集現(xiàn)象++及以上就可以判定為布魯菌病陽(yáng)性。
  2 結(jié)果
  通過(guò)四百份高危群體的樣品血清進(jìn)行細(xì)致的檢測(cè),其中試管凝集試驗(yàn)有十八份的陽(yáng)性監(jiān)測(cè)結(jié)果,虎紅平板凝集試驗(yàn)有三十六份陽(yáng)性監(jiān)測(cè)結(jié)果,并且試管凝集試驗(yàn)的十八例陽(yáng)性結(jié)果全部包含在虎紅平板凝集試驗(yàn)的三十六例陽(yáng)性結(jié)果當(dāng)中。試管凝集試驗(yàn)以及虎紅平板凝集試驗(yàn)這兩種試驗(yàn)手段有著十分重要的統(tǒng)計(jì)學(xué)含義,兩種檢測(cè)手段的陽(yáng)性結(jié)果有著極大的差異性(χ2=16.06,P﹤0.005)。如下表所示:
  通過(guò)對(duì)試驗(yàn)信息數(shù)據(jù)的有效分析,能夠得知試管凝集試驗(yàn)方法所產(chǎn)生的陽(yáng)性概率為4.50%,虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)方法所產(chǎn)生陽(yáng)性的概率為9.00%,因此,相比之下虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)相較于試管凝集試驗(yàn)的陽(yáng)性測(cè)定有著非常大的優(yōu)勢(shì)。
  我國(guó)國(guó)標(biāo)運(yùn)用試管凝集試驗(yàn)檢測(cè)手段以及虎紅平板凝集試驗(yàn)手段來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。通過(guò)實(shí)際操作我們發(fā)現(xiàn),虎紅平板有著更快的反應(yīng)速度,并且操作方式極為簡(jiǎn)單快捷,但是非常容易導(dǎo)致特異凝集的產(chǎn)生,致使假陽(yáng)性的出現(xiàn),該種方法對(duì)于大面積篩查非常適合。試管凝集試驗(yàn)可以定量定性,并且有著非常強(qiáng)的敏感性與特異性,有著非常精準(zhǔn)的判斷結(jié)果。但是使用該種方法的過(guò)程中,所需要的群體血清以及布魯菌凝集抗原的量比較大。
  在大面積篩查的過(guò)程中,虎紅平板凝集試驗(yàn)?zāi)軌虬l(fā)揮重要作用。養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)在現(xiàn)今得到了飛速的發(fā)展,檢測(cè)工作者也在持續(xù)的增多,想要更加高效精準(zhǔn)的得出檢測(cè)結(jié)果,相關(guān)工作者可以將兩種檢測(cè)方法結(jié)合進(jìn)行,進(jìn)行優(yōu)勢(shì)互補(bǔ),這樣才能使工作效率得到大幅度的提升。
  (作者單位:111000遼寧省遼陽(yáng)市太子河區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心)

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